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    紫外可見分光光度計(jì)光度準(zhǔn)確度分析
    更新時(shí)間:2017-03-22 點(diǎn)擊次數(shù):2739

    紫外可見分光光度計(jì)光度準(zhǔn)確度分析

    紫外可見分光光度計(jì)(UVS)作為集光、機(jī)、電、計(jì)算機(jī)為一體的密集高科技產(chǎn)品,具有多種性能指標(biāo),其中根本性的技術(shù)指標(biāo)為光度準(zhǔn)確度(PA)?;诖?,對(duì)紫外可見分光光度計(jì)光度準(zhǔn)確度分析極為重要。本文主要從PA的表征方法、層級(jí)間的影響因素,對(duì)紫外可見分光光度計(jì)光度準(zhǔn)確度進(jìn)行分析。希望通過本文分析,為相關(guān)人員進(jìn)行紫外可見分光光度計(jì)檢定提供借鑒。

    一、引言

    紫外可見分光光度計(jì)(UVS)作為集光、機(jī)、電、計(jì)算機(jī)為一體的密集高科技產(chǎn)品,歷史悠久、使用zui多,且覆蓋面zui廣。PA作為UVS的根本性技術(shù)指標(biāo),與測量數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性、可靠性等密切相關(guān)。目前,上存在數(shù)百家企業(yè)從事UVS生產(chǎn),但基于PA技術(shù)指標(biāo)的具體數(shù)據(jù),在準(zhǔn)確性方面還存在很多問題。基于此,本文主要從儀器學(xué)理論角度,分析PA的表征方法、層級(jí)間的影響因素,進(jìn)而分析紫外可見分光光度計(jì)的光度準(zhǔn)確度。希望通過本文分析,為相關(guān)人員進(jìn)行紫外可見分光光度計(jì)檢定提供借鑒與參考。

    二、PA的檢定方法

     

    1.PA表示方法?,F(xiàn)今,上關(guān)于PA的表示,主要通過透射比誤差(ΔT)或者是吸光度誤差(ΔA),有的廠商同時(shí)給出ΔT與ΔA,有的廠商只給其中一個(gè)。這兩種表示方式,在規(guī)則上都被允許,但實(shí)踐證明,同時(shí)給出ΔT與ΔAUVS中,幾乎都是錯(cuò)誤的。這主要由于ΔT是在整個(gè)T值范圍內(nèi)無法做到與ΔA一致。規(guī)程是用透射比誤差(ΔT)表示PA

     

    2. PA檢定方法?;?/span>UVSPA檢定,所選用的材料都是高純度、高穩(wěn)定性的物質(zhì),其中在堿性溶液中通常選用鉻酸鉀,在酸性溶液中選用重鉻酸鉀?;趬A性溶液中的鉻酸鉀,在存儲(chǔ)時(shí),不能存放在玻璃容器中,存放在石英器皿中。許多學(xué)者認(rèn)為利用紫外濾光片進(jìn)行檢定,具有較好的穩(wěn)定性以及便于攜帶的優(yōu)點(diǎn)?;?/span>UVSPA檢定方法,目前還沒有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn),譬如,美國國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定:選擇合適的標(biāo)準(zhǔn)參比材料,在規(guī)定的波長位置,連續(xù)測量10個(gè)吸光度或者是透射比讀數(shù),取這10個(gè)數(shù)的平均值,并將實(shí)際吸光度或透射比與觀測值的平均值做差,所獲得的值則是PA。美國NBS還規(guī)定,在可見區(qū)間使用930標(biāo)準(zhǔn)片進(jìn)行光度準(zhǔn)確度測量,其標(biāo)準(zhǔn)透射比值分別是10%20%、30%,此外也可以采用931標(biāo)準(zhǔn)片進(jìn)行光度準(zhǔn)確度測量,其屬于一種溶液。在紫外光區(qū),則選用203進(jìn)行光度準(zhǔn)確度測量,其屬于標(biāo)準(zhǔn)透射比值分別為90%、30%以及10%的熔融石英濾片。并頒布了可用的鉻酸鉀以及重鉻酸鉀等標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。我國于1992年制定了關(guān)于紫外可見分光光度計(jì)國家標(biāo)準(zhǔn),并規(guī)定了基于重鉻酸鉀溶液檢定紫外區(qū)的光度準(zhǔn)確度,并明確了檢定波長。并規(guī)定在可見光區(qū)使用中性濾光片檢定光度準(zhǔn)確度,標(biāo)準(zhǔn)片的透射比標(biāo)稱值選用10%、20%以及30%。此外,還使用紫外光區(qū)透射比濾光片來檢定紫外光區(qū)的光度準(zhǔn)確度。

    三、PA的主要影響因素

     

    僅從儀器本身考慮,PA的主要影響因素,可以使用數(shù)學(xué)表達(dá)式PA=f(λA、SL、NBF、SBW)描述。其中PA表述光度準(zhǔn)確度;λA代表波長準(zhǔn)確度;SL代表雜散光;N表示噪聲;BF代表基線平直度;SBW代表光譜帶寬。

     

    1.波長準(zhǔn)確度極為重要,主要由于不同物質(zhì),有不同波長,產(chǎn)生不同的摩爾吸光系數(shù),不同的摩爾吸光系數(shù)則具有不同的分析誤差。

     

    2.雜散光,作為分析誤差的主要來源,直接限制了測試試樣的濃度上限。雜散光也屬于目前學(xué)者普遍關(guān)心的問題。T. Owen研究了不同濃度的雜散光的吸光度,發(fā)現(xiàn)在相同的雜散光條件下,隨著濃度增加,吸光度逐漸增加,但成正比的范圍逐漸降低。對(duì)于雜散光與吸光度誤差關(guān)系,2Abs(吸光度值)處,當(dāng)存在0.1%的雜散光條件,吸光度誤差則為5%;在0.434Abs處,存在0.5%的雜散光,其相對(duì)誤差超過1%。

     

    3.噪聲。在UVS中,噪聲有光噪聲、電噪聲兩種,其中光噪聲的產(chǎn)生由光源的發(fā)光強(qiáng)度分布因子決定,電噪聲則來源于PMT和各種電源及放大器等。噪聲作為UVS的關(guān)鍵技術(shù)指標(biāo)之一,是主要的誤差分析來源,其直接限制了UVS檢測的下限。

     

    4.基線平直度。所謂基線平直度指的是是全波段每個(gè)波長上的噪聲,其與UVS的靈敏度以及限制檢測的下限及使用范圍密切相關(guān)。根據(jù)儀器的工作波段范圍選取A250nm,B500nmC1500nm作為噪聲的測量波長,500nm為漂移的測量波長。其中A段是紫外光區(qū)(190nm340nm),B段是可見光區(qū)(340nm900nm),C段是近紅外光區(qū)(900nm2600nm)。

     

    5.光譜帶寬。在UVS中,不同的光譜帶寬會(huì)產(chǎn)生不同的分析誤差。光譜帶寬作為影響UVS的光度準(zhǔn)確度的主要影響因素,T.Owen作了深入研究。通過分析1nm、5nm、10nm、20nm以及50nm光譜帶寬所產(chǎn)生的吸收峰特點(diǎn),發(fā)現(xiàn):對(duì)于光譜帶寬為1nm處,測試峰有兩個(gè)吸收峰,當(dāng)光譜帶寬為10nm處,試樣的吸收峰則很矮;對(duì)于光譜帶寬為20nm處,試樣存在兩個(gè)極為清晰的吸收峰,且形成馬鞍形狀;當(dāng)光譜帶寬為50nm處,試樣的兩個(gè)清晰吸收峰則形成了一個(gè)饅頭峰。這表明,基于UVS的光譜帶寬,會(huì)產(chǎn)生較大的分析誤差。

     

    四、光度準(zhǔn)確度改進(jìn)措施

    作為計(jì)量檢定者,需要認(rèn)真按照規(guī)程的規(guī)定對(duì)波長示值誤差與重復(fù)性、噪聲與漂移、光譜帶寬、透射比示值誤差與重復(fù)性、基線平直度、電源電壓的適應(yīng)性、雜散光、吸收池的配套性進(jìn)行檢定,并將我們的標(biāo)準(zhǔn)濾光片定期送到上級(jí)計(jì)量部門檢定,對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)溶液要在有限期內(nèi)使用,以保證單位的統(tǒng)一和量值的準(zhǔn)確可靠,這樣獲得可靠準(zhǔn)確的PA值,從而判定被檢紫外可見分光光度計(jì)符合哪個(gè)級(jí)別(按照計(jì)量性能的高低將被檢紫外可見分光光度計(jì)劃分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ共四個(gè)級(jí)別)。

     

    五、結(jié)語

     

    PA作為UVS的根本性技術(shù)指標(biāo),與λASL、N、BF、SBW密切相關(guān)。本文主要從PA的表征方法、層級(jí)間的影響因素,對(duì)紫外可見分光光度計(jì)光度準(zhǔn)確度進(jìn)行分析,在此基礎(chǔ)上,提出了改進(jìn)措施。希望通過本文分析,為相關(guān)人員進(jìn)行紫外可見分光光度計(jì)檢定提供借鑒與參考。

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