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    應(yīng)用尤登實(shí)驗(yàn)雙樣圖確定分光光度計(jì)分析質(zhì)量研究
    更新時(shí)間:2018-11-07 點(diǎn)擊次數(shù):2261

    分光光度計(jì)是實(shí)驗(yàn)室常用的分析儀器,各個(gè)實(shí)驗(yàn)室基本都配備多臺分光光度計(jì),但各個(gè)儀器之間有一 定差異,導(dǎo)致分析質(zhì)量受到影響,尤登實(shí)驗(yàn)雙樣圖是驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室間分析質(zhì)量的方法。它需要使用兩個(gè)樣品同時(shí) 進(jìn)行分析,將所得結(jié)果繪制成圖,用以評價(jià)分析質(zhì)量,可以一目了然的觀察出各個(gè)測定點(diǎn)的質(zhì)量差異。因其方 法簡便易行,因此決定嘗試應(yīng)用其確定實(shí)驗(yàn)室儀器分光光度計(jì)的分析質(zhì)量,以辨別各個(gè)分光光度計(jì)的分析優(yōu) 劣,從而使分析者能夠從多臺儀器中選出分析質(zhì)量好優(yōu)的儀器。

    分光光度計(jì)是實(shí)驗(yàn)室分析的重要儀器,因此,分 光光度計(jì)的分析質(zhì)量對于實(shí)驗(yàn)室分析至關(guān)重要。現(xiàn) 階段,各個(gè)實(shí)驗(yàn)室都配備有多臺不同廠家不同型號 的分光光度計(jì),而各個(gè)儀器的質(zhì)量和分析效果各不 相同,為了在多臺分光光度計(jì)中確定出一個(gè)分析質(zhì) 量相對準(zhǔn)確的一臺,對于分光光度計(jì)的儀器分析質(zhì) 量一般采取測定結(jié)果不確定度來評定,從分光光度 計(jì)主要參數(shù)的角度評定測量結(jié)果的不確定度來確定 儀器優(yōu)劣[1 - 2]?,F(xiàn)提出使用尤登雙樣圖來確定分光 光度計(jì)分析質(zhì)量。 尤登雙樣圖是美國國家標(biāo)準(zhǔn)局( NBS) 分析、統(tǒng) 計(jì)學(xué)家尤登( YOUDEN) 提出的,實(shí)驗(yàn)同時(shí)測定兩個(gè) 樣品,將結(jié)果繪制成圖,所以稱為雙樣圖。尤登雙樣 圖是使用實(shí)樣的外部質(zhì)量評定技術(shù)之一。利用尤登 試驗(yàn)制作雙樣圖可以簡便而直觀地明確反應(yīng)各個(gè)測 定結(jié)果的質(zhì)量狀況。方法簡便,計(jì)算簡單,效果明 顯。在雙樣圖上可以一目了然地觀察出各測定點(diǎn)質(zhì) 量差異。所以運(yùn)用尤登圖可以簡單明確的推斷出分 光光度計(jì)的分析質(zhì)量[3 - 5]。 1 儀器及方法 1. 1 實(shí)驗(yàn)儀器實(shí)驗(yàn)所用分光光度計(jì)共有 4 臺,以下用儀器編 號代表相應(yīng)儀器。 1. 2 實(shí)驗(yàn)方法 實(shí)驗(yàn)中使用到的標(biāo)準(zhǔn)如下: ( 1) 水質(zhì)陰離子表面活性劑的測定: 亞甲藍(lán)分 光光度法( GB 7494 - 87) 。 ( 2) 水質(zhì)總磷的測定: 鉬酸銨分光光度法( GB - 11893 - 89) 。 ( 3) 水質(zhì)氨氮的測定: 納氏試劑分光光度法( HJ 535 - 2009) 。 ①確定以 LAS、總磷、氨氮 3 個(gè)標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)為測定 指標(biāo),以上述國標(biāo)方法為實(shí)驗(yàn)方法。 ②配制標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別以這 3 項(xiàng)實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)物 質(zhì)配制一個(gè)系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。按實(shí)驗(yàn)方法顯色。 ③在相應(yīng)波長處,分別在四臺儀器下,繪制出四 條標(biāo)準(zhǔn)曲線。 ④選取 X、Y 兩個(gè)穩(wěn)定的水樣品在每臺儀器上 分別測定。實(shí)際每個(gè)樣品測定了 4 次。 ⑤每項(xiàng)實(shí)驗(yàn)由同一實(shí)驗(yàn)員,在同一環(huán)境條件下, 分別在四臺儀器上完成。 2 數(shù)據(jù)處理 將四臺儀器所報(bào)出的全部數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,因?yàn)?是為確定實(shí)驗(yàn)儀器的精密度,所以采用三個(gè)參數(shù)的 和值作為比較數(shù)據(jù),對各個(gè)儀器的比較參數(shù)根據(jù)公 式( 1) 、( 2) 對 X、Y 的結(jié)果分別求出均值( x珋) ( y珋) 和 標(biāo)準(zhǔn)差( s) 。

    因?yàn)樗鶞y數(shù)據(jù)均在 x ± 珋 4 s 范圍內(nèi),因此計(jì)算: x珋 = 0. 971 5,y = 珋 6. 454 5。 雙樣圖的繪制: 每臺儀器所測 X、Y 兩個(gè)水樣的 3 項(xiàng)實(shí)驗(yàn)和值組成一對數(shù)據(jù)。以 X 樣品濃度為橫軸,Y 樣品濃度為縱軸,兩軸的分度相同。每對測定結(jié)果在 圖上形成一個(gè)點(diǎn)。將樣品均值標(biāo)注為中心點(diǎn)。通過 中心點(diǎn)繪制垂線為 X 值線,繪制平行線為 Y 值線。 這兩條線將區(qū)域分成 + + 、+ - 、- + 、- - 四個(gè)象 限。再通過中心點(diǎn)繪制一條于 X 值線或 Y 值線成 45°角的直線,如圖 1 所示。用全部結(jié)果估算總體精 密度。并用同心圓判斷各臺儀器結(jié)果的分析質(zhì)量。

    3 精密度估算 分光光度計(jì)在日常檢測工作中,一般采用先計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性回歸方程,進(jìn)而由線性回歸方程 計(jì)算出試樣的濃度值的方法進(jìn)行試樣的檢測。標(biāo)準(zhǔn) 曲線的線性誤差大小就直接影響試樣所測濃度的準(zhǔn) 確度。標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性誤差越小,所測試樣的濃度 越接近實(shí)際濃度值。因此,線性誤差的大小反映出 該原子吸收分光光度計(jì)的性能優(yōu)劣[7]。因?yàn)槊宽?xiàng) 實(shí)驗(yàn)都是同一實(shí)驗(yàn)員,在相同環(huán)境條件下,用同一實(shí) 驗(yàn)方法,測定的同一水樣。因此 X、Y 兩個(gè)水樣除儀 器外的其它系統(tǒng)誤差都是相同的[6]。當(dāng)將各對測 定結(jié)果分別計(jì)算和值 Ti 和差值 Di 時(shí),則 Ti 和 Di 都 包含 X、Y 兩個(gè)水樣的測定誤差。其中 Di 在其它條 件相同的情況下,其它誤差已被消除,因而只含儀器 帶來的誤差。因此可用 Ti 估算總體標(biāo)準(zhǔn)偏差 sT,用 Di 估算所確定儀器的標(biāo)準(zhǔn)偏差 sr。如果 s 2 T = s2 r ,則 表明所確定各儀器間不存在系統(tǒng)誤差。如果 sT > sr,則表明存在儀器間的系統(tǒng)誤差,儀器間的系統(tǒng)誤 差可通過方差分析其顯著性水平來確定儀器間的差 異影響是否顯著。 圖 1 四儀器尤登雙樣圖 4 分析分光光度計(jì)儀器誤差 尤登實(shí)驗(yàn)的每對測定結(jié)果,測定次數(shù)可以不多, 所以經(jīng)常表現(xiàn)出相對系統(tǒng)誤差。尤登實(shí)驗(yàn)雙樣圖中 的點(diǎn)位位置就表現(xiàn)出各類誤差的狀況,包括隨機(jī)誤 差、系統(tǒng)誤差和總誤差。在尤登實(shí)驗(yàn)雙樣圖中既可 以直觀地表現(xiàn)出各臺儀器的質(zhì)量狀況,也可以通過 作圖和誤差計(jì)算,得出各類誤差的大小。 基于尤登實(shí)驗(yàn)雙樣圖確定分光光度計(jì)儀器分析 質(zhì)量時(shí),首先強(qiáng)調(diào)除儀器外的其它誤差是相同的。測 定結(jié)果落在中心點(diǎn)越近,表明該儀器的測定準(zhǔn)確度越 高,距離越遠(yuǎn)表明儀器測定的準(zhǔn)確度越低。坐標(biāo)點(diǎn)與 45°角直線的垂線距離為儀器隨機(jī)誤差,垂點(diǎn)到中心 距離為儀器系統(tǒng)誤差。如圖以確定 008 儀器誤差為 例,從 008 測定結(jié)果落點(diǎn)做與 45°角直線的垂線 MN, 則 MO 代表 008 儀器的總誤差,MN 代表儀器隨機(jī)誤 差,NO 代表儀器系統(tǒng)誤差。由圖可以看出 038、009 兩臺儀器準(zhǔn)確性較 008、010 兩臺儀器好,038、010 兩 臺儀器穩(wěn)定性較 008、009 兩臺儀器*。

    5 結(jié)論

    ( 1) 通過尤登實(shí)驗(yàn)雙樣圖確定所用的 4 臺實(shí)驗(yàn) 室分光光度計(jì) 038 誤差小,038、009 兩臺儀器準(zhǔn) 確性較 008、010 兩臺儀器好,038、010 兩臺儀器穩(wěn) 定性較 008、009 兩臺儀器*。 ( 2) 應(yīng)用尤登實(shí)驗(yàn)雙樣圖確定實(shí)驗(yàn)儀器分光光 度計(jì)分析質(zhì)量具有簡便,直觀的優(yōu)點(diǎn)。該方法實(shí)驗(yàn) 室操作簡便可行??梢酝ㄟ^尤登實(shí)驗(yàn)所測數(shù)據(jù)分析 各臺儀器間是否存在系統(tǒng)誤差,存在的系統(tǒng)誤差是 否顯著。通過雙樣圖可以直觀的看到各臺儀器間的 總體誤差、隨機(jī)誤差、系統(tǒng)誤差大小,直觀地看到各 個(gè)分光光度計(jì)的優(yōu)劣。 ( 3) 利用在尤登實(shí)驗(yàn)雙樣圖作圖可以計(jì)算各臺 儀器的的各類誤差的大小,有利于對儀器質(zhì)量作出 明確判斷。

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