紫外可見分光光度計法測間甲酣
本法系依據(jù)4-氨基安替比林、鐵qinhuajia在堿性條件下
與間甲酚反應(yīng)生成一種紅色物質(zhì),用比色法測定供試品中間甲酚含量。
測定法精密量取一定體積的供試品,置試管中,定•
量稀釋50倍,即為供試品溶液。量取供試品溶液1.0ml,
加水5. 0ml,混勻,依次加pH9.8緩沖液(稱取無水碳酸
鈉6_36g、碳酸氫鈉3.36g,加水溶解并稀釋至8 0 0 m h用
lmol/L鹽酸調(diào)p H 值至9.8后,再加水至1000ml)、0.3%
4-氨基安替比林溶液、1 .2 %鐵qinhuajia溶液及lmol/L磷酸
二氫鉀溶液各1.0ml,混勻,于室溫避光放置1 0分鐘,
照紫外-可見分光光度法(通則0401),在波長5 1 0 m n處
測定吸光度。
精密量取間甲酚對照品溶液(取間甲酚適量,精密稱
定,置量瓶中,加水溶解并稀釋至每l m l含10Mg)
1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml、6. Oml, 分別置
試管中,加水補至6.0ml,自“依次加p H 9 . 8緩沖液”
起,同法操作,測定各管的吸光度。
以間甲酚對照品溶液的系列濃度對其相應(yīng)的吸光度作
直線回歸,將供試品溶液的吸光度代人直線回歸方程,得
供試品的間甲酚含量(mg/ml)。
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